核酸染料選擇指南，請(qǐng)點(diǎn)擊http://thehaddington.com/news_detail.aspx?NewsID=24
RealSafe Gold核酸染色劑
● 產(chǎn)品規(guī)格：
|
產(chǎn)品編號(hào)
|
產(chǎn)品名稱
|
包裝
|
貯存
|
運(yùn)輸
|
|
GR003
|
RealSafe Gold核酸染色劑
|
0.5
ml
|
4-8℃
|
常溫
|
|
-
|
說(shuō)明書
|
一份
|
|
|
● 簡(jiǎn)介：
RealSafe Gold?是一種可以替代溴化乙錠（EB）的綠色熒光核酸染色劑，與SYBR Gold是類似產(chǎn)品。與SYBR或EB相比，RealSafe Gold最顯著的特性是其在多種條件下的高靈敏性和穩(wěn)定性。另外，與RealSafe Red相比，RealSafe Gold在藍(lán)光儀下條帶更清晰。同時(shí)，相對(duì)EB或SYBR，RealSafe Gold誘導(dǎo)突變的能力極低。
特點(diǎn)：1.
靈敏度高，小分子片段更清晰。
2. 對(duì)核酸上樣量有更好的兼容性，不會(huì)出現(xiàn)濃度高片段彎曲現(xiàn)象。
3. 染料在膠中遷移度低，電泳后紫外觀察不會(huì)出現(xiàn)陰陽(yáng)膠現(xiàn)象。
4.
花菁素染料，安全無(wú)毒。
5.
對(duì)單鏈DNA有更高的靈敏性。
● 貯存、效期及運(yùn)輸：
4-8℃避光保存，有效期2年，常溫運(yùn)輸。
● RealSafe Gold的使用方法：
注意：染料使用前應(yīng)在常溫下徹底融化混勻后使用。
1. RealSafe Gold預(yù)染方法（推薦方法）：
1.1
將RealSafe Gold試劑按1:10000溶于瓊脂糖凝膠溶液中，充分混勻。（例如：將5 μl RealSafe Gold 試劑加入到50 ml 凝膠溶液中）。注：由于RealSafe Gold 具有出色的熱穩(wěn)定性，可將試劑直接加入高溫的凝膠溶液中，而不用等凝膠溶液冷卻后再加入。
1.2 澆制凝膠并使其凝固后上樣電泳。
注意：使用這種預(yù)先加入染色劑的瓊脂糖凝膠，每次不易加入太多的 DNA 樣品，否則容易造成飽和現(xiàn)象，可以做多個(gè)不同濃度的 DNA Marker，以確定最佳 DNA 上樣量。
1.3推薦藍(lán)光下觀察結(jié)果。
注：如果始終出現(xiàn)拖尾或是條帶無(wú)法分離的現(xiàn)象，您可以使用后染法對(duì)DNA染色，以確認(rèn)問(wèn)題是否與染色劑有關(guān)。如果使用后染法問(wèn)題依舊存在，則說(shuō)明問(wèn)題與染色劑無(wú)關(guān)，請(qǐng)嘗試減少核酸的上樣量后進(jìn)行電泳。
2. RealSafe Gold后染方法：
2.1
用水將RealSafe Gold稀釋約3,300倍，制成3X染色溶液。(例如：將15 μl RealSafe Gold加入到45 ml 水中)。
2.2 將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3X染色溶液浸沒(méi)凝膠。
2.3
在常溫下輕輕地?fù)u動(dòng)凝膠板，最佳的染膠時(shí)間為30 分鐘，這取決于凝膠板的厚度、瓊脂糖或聚丙烯酰胺的濃度和 DNA 的長(zhǎng)短。凝膠越厚或瓊脂糖的濃度越高，染色所需要的時(shí)間就越長(zhǎng)。
注：染色溶液至少可重復(fù)使用2-3次。如果不是立即再用的話，建議將用過(guò)的染色溶液冷藏保存。
2.4 推薦藍(lán)光下觀察結(jié)果。
● 實(shí)驗(yàn)示例：
1 瓊脂糖凝膠RealSafe Gold染色：
2. PAGE凝膠染色：
RealSafe Gold染色
10% PAGE TBE Gel
RealSafe Gold需要用藍(lán)光儀下才能看得更清楚，紫外下靈敏度不夠